近年來(lái)隨著分離純化技術(shù)的提高,關(guān)于外泌小體的研究成果頗豐;這進(jìn)一步吸引了越來(lái)越多領(lǐng)域的課題將外泌體納入研究對(duì)象。研究的前提是方便、高效、標(biāo)準(zhǔn)化地分離純化外泌小體。經(jīng)過(guò)近20年的探索,已經(jīng)建立了超速離心法、沉淀法、色譜法、親和純化法等。在大量實(shí)踐中大家逐漸認(rèn)識(shí)到根據(jù)下游研究對(duì)樣品的要求,以及起始樣品的規(guī)模、數(shù)量,可以選擇不同的外泌體制備策略。因不需要特殊的設(shè)備和試劑盒,對(duì)操作人員也沒(méi)有特別的經(jīng)驗(yàn)要求,超濾法后來(lái)居上,成為實(shí)驗(yàn)室中制備外泌體的通用方法。超濾濃縮管零售多少錢呢?奉賢區(qū)Merck超濾濃縮管聯(lián)系電話
Minicon?濃縮器 Minicon? 濃縮器用于在電泳或免疫電泳分析前對(duì)尿液和腦脊液進(jìn)行濃縮,以增強(qiáng)對(duì)不正?;虿B(tài)的蛋白質(zhì)(例如尿中的 Bence Jones 蛋白)的識(shí)別。B15型有 8 個(gè)濃縮單元,用于 5mL 樣本的處理;CS15型有 10 個(gè)濃縮單元,適合 2.5mL 樣品的處理。溶劑和鹽分通過(guò)超濾被吸收劑吸收而樣品被濃縮。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用 靜態(tài)濃縮器,不需要其它輔助裝置 濃縮倍數(shù)達(dá)到 100 倍,樣品終體積小 同時(shí)濃縮多個(gè)臨床樣品 特別推薦用于尿液、腦脊液等的蛋白 富集分析Merck超濾濃縮管聯(lián)系人超濾濃縮管的優(yōu)缺點(diǎn)您知道嗎?
濃度:當(dāng)需要截留的樣品濃度很低時(shí),通量通常不受濃度影響。操作過(guò) 程中,隨著溶質(zhì)濃度的升高,增加的粘滯性和極化將導(dǎo)致通量降低。 溫度:粗體,作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時(shí)的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴(kuò)散率增加 3-3.5%,同時(shí)溶液粘度降低。 實(shí)踐中一般是以樣品和設(shè)備能耐受的比較高溫度來(lái)操作。 pH:改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結(jié)構(gòu),蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會(huì)沉淀,產(chǎn)生堵塞和得率損失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的濃差極化,還有其它小顆粒和分子會(huì) 在膜上富集和沉淀,逐漸堆積在膜孔上或膜孔結(jié)構(gòu)中,形成結(jié)晶和沉淀。
截留 截留有時(shí)也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強(qiáng) 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,從而導(dǎo)致排阻增加。比如,有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會(huì)發(fā)生多聚化,而另一些則發(fā)生解聚(如血紅素蛋白)成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗(yàn),我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先,再根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整。益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。
Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮(3kDa 細(xì)胞色素 C, 10kDa 細(xì)胞色素 C,30kDa BSA,100kDa IgG), 測(cè)定在離心一定時(shí)間后的回收率。數(shù)據(jù)顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產(chǎn)品,默克密理博生命科學(xué)部網(wǎng) 站上提供選擇指引,您需要按照提 示進(jìn)行選擇,**終會(huì)選出一款產(chǎn)品。 為每次實(shí)驗(yàn)選擇**合適的, 您也能快速成為超濾高手!超濾濃縮管咨詢服務(wù)電話多少呢。金山區(qū)默克15ml超濾濃縮管一級(jí)代理
那么超濾濃縮管施工的優(yōu)勢(shì)都有哪些呢?奉賢區(qū)Merck超濾濃縮管聯(lián)系電話
7次低速離心,總耗時(shí)~100分鐘(含60分鐘孵育時(shí)間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(可選用50k MWCO型號(hào))。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。奉賢區(qū)Merck超濾濃縮管聯(lián)系電話
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