特別推薦應用（提供實驗報告作為參考） Microcon?超濾管： Microcon?PCR 級超濾管： ? 法醫(yī)鑒定分析的DNA樣品制備 ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 體外合成mRNA的純化 ? 以人mRNA或總RNA制備熒光DNA探針 ? 游離標記物的去除 ? 納克級核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 ? 替代乙醇沉淀，離心法高效濃縮基因組DNA 應用指南 典型應用 肽及生長因子濃縮 蛋白濃縮與脫鹽 電泳等操作前的蛋白樣品濃縮 HPLC前去除蛋白 組織培養(yǎng)抽提物和細胞裂解液中大分子成分的純化 生物樣本濃縮（抗原，抗體，酶等） 從含有SDS（或無SDS）的緩沖液中濃縮gDNA 核酸濃縮與脫鹽（單鏈或雙鏈核酸） 去除標記核苷酸 去除標記氨基酸 從擴增的DNA產(chǎn)物中去除引物 克隆前去除連接序列（linker）超濾濃縮管的好處有很多。浦東新區(qū)默克4ml超濾濃縮管代理商

這種小管適合在1.5mL離心機中使用，其Ultracel?超濾膜對于蛋白及其它成分都表現(xiàn)出 極低的非特異性結合，連同醫(yī)藥級O型圈封閉設計，確保更少的樣品丟失，更穩(wěn)定的數(shù)據(jù)結果。諸多考慮周到的精細設計使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點與優(yōu)點： 低吸附膜和反轉(zhuǎn)回收設計，即使是小體積、低濃度樣品得率也能達到95%以上 可以用產(chǎn)品自帶的1.5mL樣品收集管存儲濾過液和濃縮產(chǎn)物 濃縮倍數(shù)可達100X 操作簡便快捷，易于標準化。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專門設計用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA。管子和膜均為低非特異性吸附的材質(zhì)，醫(yī)用級O型圈密封，保證了在洗滌步驟中樣品丟失**少。反轉(zhuǎn)回收設計，即使樣品量很小也能獲得理想的得率，濃縮倍數(shù)可以達到20X。浦東新區(qū)Merck離心濃縮管銷售益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。

離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”，操作時樣品首先被濃縮，繼而加入新的溶液，再次濃縮時，原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復雜，過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發(fā)生反應而產(chǎn)生溶出污染。關于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學相容性請參考產(chǎn)品使用說明書或垂詢技術支持專線 ?；厥章始捌渲匾猿瑸V的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質(zhì)，但膜的很多特性會對這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括：? 標稱分子量限制（NMWL）/ 核酸截留分子量（NCO）? 截留 ? 濃差極化 ? 通量

Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag，His?Tag等重組表達蛋白及抗體，適合～0.5 mL裂解液操作 6次低速離心，總耗時~100分鐘（含65分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]購買超濾濃縮管就找益啟生物公司。

濃度：當需要截留的樣品濃度很低時，通量通常不受濃度影響。操作過 程中，隨著溶質(zhì)濃度的升高，增加的粘滯性和極化將導致通量降低。 溫度：粗體，作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴散率增加 3-3.5%，同時溶液粘度降低。 實踐中一般是以樣品和設備能耐受的比較高溫度來操作。 pH：改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結構，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會沉淀，產(chǎn)生堵塞和得率損失。 污垢：溶液中除了目的分子造成的濃差極化，還有其它小顆粒和分子會 在膜上富集和沉淀，逐漸堆積在膜孔上或膜孔結構中，形成結晶和沉淀。上海超濾濃縮管哪家比較專業(yè)。浦東新區(qū)默克4ml超濾濃縮管代理商

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對于慢***推薦Amicon? Ultra 100kDa; 對于腺***推薦Amicon? Ultra 50kDa。具體的操作步驟可以參考***濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003的產(chǎn)品使用說明書。另提供AAV（腺相關***）的制備方法供參考。 去污劑因其獨特的性質(zhì)，當濃度大于臨界微團濃度（Critical Micelle Concentration, CMC）時，去污劑分子會聚集形成微團而改變分子構象，這有可能會影響去污劑的去除效果。 Amicon? Ultra超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析，可用緩沖液或Milli-Q?水預清洗。如果干擾仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。浦東新區(qū)默克4ml超濾濃縮管代理商

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