將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內(nèi)加入預(yù)先準(zhǔn)備好的1.5 mL含有染料的反應(yīng)混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優(yōu)化選做：將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時(shí)濃縮。 8. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標(biāo)記好的抗體。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)，滯留體積很小，樣品損失少， 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達(dá)到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計(jì)的死體積防止離干，保證樣品回收率和活性 超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜。江蘇濃縮管聯(lián)系方式

Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜，生產(chǎn)工藝嚴(yán)格，截留分子量明確而精細(xì)，蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白，那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少？ 按照經(jīng)驗(yàn)，建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)（10倍）。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的，但是對(duì)滅菌處理的具體方法沒有做相關(guān)的測(cè)試，所以無法提供更進(jìn)一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計(jì)，不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶，建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時(shí)，以完全滅活RNA酶；殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。江蘇濃縮管聯(lián)系方式益啟生物公司就帶您了解一下超濾濃縮管的特點(diǎn)。

通量（超濾效率）及其影響因素 超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積，使用高 NMWL 濾膜可以增加通量，但同時(shí) 會(huì)降低回收率。選擇膜和裝置時(shí)需要同時(shí)考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多，包括： 壓力：較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進(jìn)行超濾時(shí)，流量隨著跨膜壓力 （TMP）的增大而增加。正壓條件下操作，如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯， 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***，通量會(huì)達(dá)到一個(gè)平臺(tái)，甚 至可能隨著壓力的增加而降低。

脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心，總耗時(shí)~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做：加入1.5 mL用于置換的緩沖液，1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規(guī)格可選）。 4. 加入1.5 mL樣品，4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液，4,000×g離心15 min，換液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí)，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間，也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細(xì)信息。你知道超濾濃縮管的用途嗎？

抗體標(biāo)記 適合25-200μg樣品操作 5次低速離心，總耗時(shí)~50分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 加入抗體樣品 ? 對(duì)于比較稀釋的樣品（< 1 mg/mL） - 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）。 - 加上至多1 mL抗體樣品， 4,000×g離心15 min。 ? 對(duì)于濃度較高的的樣品（≥ 1 mg/mL） - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）中加入至多100μL樣品。 - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）中加入至多100μL樣品。 大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內(nèi)濃縮至350μL；死體積設(shè)計(jì)確保樣品不會(huì)被離干而損失。 超濾濃縮管的系列有很多種。江蘇濃縮管聯(lián)系方式

超濾濃縮管的各種系列應(yīng)用領(lǐng)域還是不一樣的。江蘇濃縮管聯(lián)系方式

如果能確保用同樣的超濾管對(duì)其它蛋白成功操作的話，那么有可能是這個(gè)目的蛋白的原因。有時(shí)蛋白會(huì)因其本身的一些特性（構(gòu)象差異）而影響濃縮效果，建議選用上一分子量級(jí)別的超濾管（如原本選用30k，此時(shí)可以選擇10k）。 2）如果目的樣本也不在濾過液中，那么： a）蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL？ b）用來確定樣本濃度的方法是什么？是否可信？ c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是的，具體解決方法請(qǐng)參考上面的關(guān)于蛋白沉淀問題的解釋。江蘇濃縮管聯(lián)系方式