7次低速離心，總耗時(shí)~100分鐘（含60分鐘孵育時(shí)間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號(hào)）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min，置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。上海超濾濃縮管銷售公司。無錫離心濃縮管報(bào)價(jià)

蛋白復(fù)性，溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理，采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時(shí)發(fā)生沉淀和離心操作剪切力對(duì)樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設(shè)計(jì)的透析管，**提高了樣品透析表面積，在2-5小時(shí)內(nèi)即可完成透析，是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)： 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質(zhì)，增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會(huì)像使用夾子或打結(jié)那樣造成樣品滲漏和污染，安全可靠 旋蓋式設(shè)計(jì)，易于打開和關(guān)緊 硬管設(shè)計(jì)，易于更充分地吸取、移走樣品，即使是μL級(jí)樣品加樣方便，功能多樣 ? 采用標(biāo)準(zhǔn)***頭加樣，而非注射器和針頭加樣，減少膜破損的風(fēng)險(xiǎn)提供的浮漂適合在常見的廣口燒杯中使用，方便在透析過程中換液D-Tube? 透析管還可以用于從瓊脂糖或丙烯酰凝膠電洗脫樣品長(zhǎng)寧區(qū)默克15ml超濾濃縮管一級(jí)代理上海Millipore超濾濃縮管授權(quán)代理商！

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當(dāng)于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上（以避免抗體洗脫下來對(duì)外泌體的干擾），請(qǐng)參考默克磁珠操作說明書。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號(hào)信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn)，相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實(shí)驗(yàn)室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題，真是惠而不費(fèi)，不亦樂乎？

微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì)，表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù) NMWL分級(jí)，有時(shí)也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見，實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí)膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí)，孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對(duì)一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí)，需要謹(jǐn)慎地選擇合適的NMWL膜和設(shè)備。上海超濾濃縮管哪家比較專業(yè)。

脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心，總耗時(shí)~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做：加入1.5 mL用于置換的緩沖液，1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規(guī)格可選）。 4. 加入1.5 mL樣品，4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液，4,000×g離心15 min，換液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí)，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間，也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細(xì)信息。益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。江蘇Merck超濾濃縮管咨詢報(bào)價(jià)

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特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn) 溫和的磁力攪拌避免發(fā)生聚集和剪切變性 所有型號(hào)都可以高壓滅菌 提供 3 種規(guī)格共選擇，用于濃縮 3mL - 400mL 及更大體積樣品 濃度達(dá) 10% 的溶液依然可以獲得高流速 應(yīng)用： 大分子（如蛋白、酶、抗體和***）溶液的濃縮和緩沖液置換 滲濾（Diafiltration）模式 非連續(xù)滲濾是換液的一種操作方法，即先濃縮到一定濃度再稀釋到起始的體積，并多次重復(fù)這個(gè)操作，直到溶液中的鹽或溶劑被 去除或降到需要的濃度。而連續(xù)滲濾（保持恒定體積）是將超濾杯經(jīng)轉(zhuǎn)換裝置（目錄號(hào)6003）與補(bǔ)液杯（目錄號(hào)6028）連接， 使供氣壓和液體流轉(zhuǎn)。連接有轉(zhuǎn)換裝置時(shí)，不必停下系統(tǒng)的運(yùn)轉(zhuǎn)就可以即時(shí)進(jìn)行濃縮和滲濾之間的切換，將兩種操作模式的優(yōu)點(diǎn) 集中在一起，有利于敏感的（蛋白）樣品在**恒定、溫和的條件下高效換液。無錫離心濃縮管報(bào)價(jià)